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(R506BMB) METHODES ALTERNATIVES
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Concernant le contexte biologique et les protéines étudiées dans ce TP, choisir la bonne réponse :
Des chercheurs s’intéressent à la régulation de l’expression de protéines chez un microorganisme eucaryote cultivé en présence (+) ou non (-) d’hème (source de fer). Un western-blot a donc été réalisé en déposant des échantillons de protéines extraites à partirdes cultures effectuées dans les différentes conditions. Trois anticorps primaires ont été mis encontact avec la membrane de western-blot :- un Ac anti-protéine A ;- un Ac anti-protéine B ;- un Ac anti- actine.Il est rappelé que l’actine est exprimée de façon constitutive dans les différentes conditions de cultureutilisées.La position des Ac I sur la membrane est révélée par la fixation d’un anticorps secondaire (Ac II)couplé à une péroxydase, laquelle émet des photons en présence de son substrat, le luminol.Les résultats sont présentés figure 1.
A partir de ce graphique, choisir les propositions vraies concernant les informations que l'on peut tirer de cette figure :
Lors de l'électrophorèse les protéines migrent vers l'anode.
Une bande d'électrophorèse correspond à 1 seule protéine de poids moléculaire donné
Concernant le transfert, il permet :
Quel composant n'est pas présent dans le tampon Laemli
Concernant la saturation de la membrane
Concernant l'Electrophorèse SDS (SDS-PAGE), elle permet :
Concernant le marquage de l'actine réalisé en TP