La fixation du substrat à l’enzyme permet au substrat de se trouver dans un état proche de l’état de transition.

Lorsque le substrat est dans son état de transition son énergie libre est plus faible.

Le site actif de tous les types d'enzymes est constitué des mêmes 3 acides aminés rapprochés par le repliement de la protéine.

La fixation du substrat sur les acides aminés du site actif des enzymes est réalisée par des liaisons fortes.